免疫沉淀分析（Immunoprecipitation, IP）是一种基于抗原-抗体特异性结合的技术，用于从复杂的生物样品中分离和富集特定蛋白质或其复合物。该技术通过使用特异性抗体捕获目标蛋白，再通过洗脱和检测步骤，实现目标蛋白的分离和功能分析。该方法在分子生物学、蛋白质组学和生物医学研究中应用广泛，特别是在研究蛋白质相互作用、翻译后修饰以及功能机制方面。作为一种灵活、有效的工具，免疫沉淀分析能够针对特定的生物学问题设计实验。例如，研究者可以利用这项技术验证蛋白质间的相互作用，揭示信号通路中的关键节点；也可以通过检测目标蛋白的翻译后修饰状态（如磷酸化、乙酰化等），深入了解其在调控细胞活动中的角色。此外，这项技术还是验证其他高通量组学数据的重要手段，为生物分子功能的研究提供了可靠支持。作为蛋白质组学领域的技术先锋，百泰派克生物科技提供全面的免疫沉淀分析服务，涵盖从实验设计、样品处理到后续分析的完整流程。

一、免疫沉淀分析的技术原理与流程

免疫沉淀分析的核心是抗体与目标蛋白之间的特异性结合，利用抗体分子的一端与目标蛋白的抗原表位结合，另一端则通过结合介质（如蛋白A/G磁珠或琼脂糖珠）实现分离操作。具体流程包括以下步骤：

1、样品制备

将生物样品（如细胞裂解液、组织匀浆）处理成可溶性状态，确保目标蛋白保持天然构象和生物学活性；为了提高分析的准确性，样品裂解和处理过程中需避免蛋白质的降解和修饰丢失。

2、抗体结合

将特异性抗体加入样品中，利用其高亲和性识别目标蛋白。选择合适的抗体（单克隆或多克隆）对实验结果至关重要，抗体的特异性和敏感性直接决定了目标蛋白的捕获效率。

3、免疫复合物富集

通过结合介质将抗体-目标蛋白复合物从样品中分离出来。蛋白A或G珠子与抗体Fc段结合，通常作为分离手段的一部分，利用离心或磁分离去除未结合的样品组分。

4、洗涤和洗脱

使用适当的缓冲液清洗免疫复合物，以去除非特异性结合的成分，随后通过变性缓冲液或其他试剂将目标蛋白从抗体上洗脱下来。

5、检测与分析

分离后的目标蛋白可通过SDS-PAGE和Western Blot检测其表达情况，也可以进一步进行质谱分析以研究其修饰状态或相互作用分子。

二、应用场景及意义

免疫沉淀分析的应用涵盖了多种研究领域。例如：

1、蛋白质相互作用研究

通过共免疫沉淀（Co-IP），研究者可以验证两种或多种蛋白质在细胞内是否存在相互作用，这对解析信号通路中的调控网络具有重要意义。

2、翻译后修饰检测

利用特异性修饰抗体（如磷酸化或乙酰化抗体），免疫沉淀分析能够富集修饰状态的蛋白质，揭示调控信号的节点。

3、蛋白质复合物组成分析

通过免疫沉淀富集复合物中的一个关键蛋白，结合质谱技术，可解析复合物的组成，进一步理解其功能。

4、靶蛋白鉴定与验证

在药物开发中，免疫沉淀常被用于验证潜在药物靶点的表达和状态，为药物研发提供直接证据。

三、注意事项与常见问题

免疫沉淀分析的成功与实验设计和操作细节密切相关。首先，抗体选择是实验的关键，应确保其具有高特异性和低背景噪声。其次，样品处理过程中需避免蛋白质降解，加入蛋白酶抑制剂是常见的预防措施。此外，非特异性结合可能导致背景信号增高，可通过优化洗涤条件和缓冲液组成加以改进。最后，定量分析时需特别注意实验重复性和抗体的定量能力。

百泰派克生物科技提供免疫共沉淀法（CO-IP）蛋白质相互作用分析服务，我们的专业团队经验丰富，能够根据客户需求定制高效的解决方案，无论是蛋白质相互作用验证、翻译后修饰研究，还是靶点验证，都能为您的研究提供精准支持。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

>>点击了解更多优质服务项目